Οι πιο επιρρεπείς σε αποτυχίες και λύσεις HPLC

As a high-precision instrument, HPLC can easily lead to some troublesome small problems if it is not operated in the correct way during use. One of the most common problems is the column compression problem. Πώς να αντιμετωπίσετε γρήγορα ένα ελαττωματικό χρωματογραφία. Το σύστημα HPLC αποτελείται κυρίως από ένα μπουκάλι δεξαμενής, μια αντλία, έναν εγχυτήρα, μια στήλη, έναν θάλαμο θερμοκρασίας στήλης, έναν ανιχνευτή και ένα σύστημα επεξεργασίας δεδομένων. For the whole system, the pillars, pumps and detectors are the key components and the main locations that are prone to problems.

Το κλειδί για την πίεση της στήλης είναι η περιοχή που χρειάζεται ιδιαίτερη προσοχή όταν χρησιμοποιείτε HPLC. Η σταθερότητα της πίεσης της στήλης σχετίζεται στενά με το χρωματογραφικό σχήμα κορυφής, την απόδοση της στήλης, την αποτελεσματικότητα του διαχωρισμού και τον χρόνο συγκράτησης. Η σταθερότητα πίεσης της στήλης δεν σημαίνει ότι η τιμή πίεσης είναι σταθερή σε σταθερή τιμή, αλλά μάλλον ότι το εύρος διακύμανσης της πίεσης είναι μεταξύ 345kPa ή 50psi (επιτρέποντας τη χρήση κλίσης έκλουσης όταν η πίεση της στήλης είναι σταθερή και αργά μεταβαλλόμενη). Πολύ υψηλή ή πολύ χαμηλή πίεση είναι ένα πρόβλημα πίεσης στήλης.

Οι πιο επιρρεπείς σε αποτυχίες και λύσεις HPLC

1, high pressure is the most common problem in the use of HPLC. This means a sudden rise in pressure. In general, there are the following reasons: (1) In general, this is due to flow channel blockage. At this point, we should examine it piecewise. ένα. First, cut off the inlet of the vacuum pump. Σε αυτό το σημείο, ο σωλήνας PEEK ήταν γεμάτος με υγρό έτσι ώστε ο σωλήνας εμφάνισης να ήταν μικρότερος από το μπουκάλι διαλύτη για να δει αν το υγρό στάζει κατά βούληση. If the liquid is not dripping or dripping slowly, the solvent filter head is blocked. Treatment: Soak in 30% nitric acid for half an hour and rinse with ultrapure water. If the liquid drips randomly, the solvent filter head is normal and is being checked; β. Open the Purge valve so that the mobile phase does not pass through the column, and if the pressure is not significantly reduced, the filter white head is blocked. Treatment: Filtered whiteheads were removed and sonicated with 10% isopropanol for half an hour. Assuming that the pressure drops below 100PSI, the filtered white head is normal and is being checked; ντο. Remove the exit end of the column, if the pressure does not decrease, the column is blocked. Treatment: If it is a buffer salt blockage, rinse 95% until the pressure is normal. If the obstruction is caused by some more highly preserved material, a stronger flow than the present mobile phase should be used to rush towards normal pressure. Εάν η μακροπρόθεσμη πίεση καθαρισμού δεν μειωθεί σύμφωνα με την παραπάνω μέθοδο, η είσοδος και η έξοδος της στήλης μπορεί να θεωρηθεί ότι συνδέεται με το όργανο αντίθετα και η στήλη μπορεί να καθαριστεί με την κινητή φάση. At this time, if the column pressure is still not reduced, the column entrance sieve plate can only be replaced, but once the operation is not good, it is easy to lead to the reduction of the column effect, so try to use less. For difficult problems, column replacement may be considered.

(2) Λανθασμένη ρύθμιση ρυθμού ροής: Ο σωστός ρυθμός ροής μπορεί να επαναφέρονται.

(3) Λανθασμένος λόγος ροής: Ο δείκτης ιξώδους διαφορετικών αναλογιών ροών είναι διαφορετικός και η αντίστοιχη πίεση του συστήματος της ροής με υψηλότερο ιξώδες είναι επίσης μεγαλύτερη. Εάν είναι δυνατόν, οι διαλύτες χαμηλότερου ιξώδους μπορούν να αντικατασταθούν ή να επαναληφθούν και να προετοιμαστούν.

(4) Πίεση συστήματος μηδενική μετατόπιση: Ρυθμίστε το μηδέν του αισθητήρα στάθμης υγρού.

2, η πίεση είναι πολύ χαμηλή (1) προκαλείται συνήθως από διαρροή συστήματος. Τι να κάνετε: Βρείτε κάθε σύνδεση, ειδικά τη διεπαφή και στα δύο άκρα της στήλης, και σφίξτε την περιοχή διαρροής. Αφαιρέστε την ανάρτηση και σφίξτε ή στεγνώστε το φιλμ PTFE με την κατάλληλη δύναμη.

(2) Το αέριο εισέρχεται στην αντλία, αλλά η πίεση είναι συνήθως ασταθής αυτή τη στιγμή, υψηλή και χαμηλή. Πιο σοβαρά, η αντλία δεν θα είναι σε θέση να απορροφήσει το υγρό. Μέθοδος θεραπείας: Ανοίξτε τη βαλβίδα καθαρισμού και καθαρίστε με ρυθμό ροής 3 ~ 5ml/min. Εάν όχι, οι φυσαλίδες αέρα αναρροφήθηκαν στη βαλβίδα εξαγωγής χρησιμοποιώντας έναν ειδικό σωλήνα βελόνας.

(3) Χωρίς εκροή κινητής φάσης: Ελέγξτε εάν υπάρχει κινητής φάσης στη φιάλη δεξαμενής, είτε ο νεροχύτης βυθίζεται στην κινητή φάση και αν η αντλία λειτουργεί.

(4) Η βαλβίδα αναφοράς δεν είναι κλειστή: η βαλβίδα αναφοράς είναι κλειστή μετά την επιβράδυνση. Συνήθως κατεβαίνει στο 0,1. ~ 0,2ml/ λεπτό μετά το κλείσιμο της βαλβίδας αναφοράς.

Περίληψη:

Σε αυτή την εργασία αναλύονται μόνο κοινά προβλήματα στην υγρή χρωματογραφία. Φυσικά, στην πρακτική μας εφαρμογή, θα αντιμετωπίσουμε περισσότερα άλλα προβλήματα. Στη διαχείριση σφαλμάτων, θα πρέπει να ακολουθήσουμε τις ακόλουθες αρχές: αλλάζουμε μόνο έναν παράγοντα κάθε φορά για να προσδιορίσουμε τη σχέση μεταξύ του υποθετικού παράγοντα και του προβλήματος. Γενικά, όταν αντικαθιστούμε τα μέρη για την αντιμετώπιση προβλημάτων, θα πρέπει να δώσουμε προσοχή στη διάλυση των αποσυναρμολογημένων άθικτων εξαρτημάτων για να αποτρέψουμε τα απόβλητα. Η διαμόρφωση μιας καλής συνήθειας ρεκόρ είναι το κλειδί για την επιτυχία του χειρισμού σφαλμάτων. Συμπερασματικά, όταν χρησιμοποιείτε HPLC, είναι σημαντικό να δώσετε προσοχή στην προεπεξεργασία δείγματος και στην κατάλληλη λειτουργία και συντήρηση του εξοπλισμού.