Οι πιο επιρρεπείς σε αστοχίες και λύσεις HPLC

Ως όργανο υψηλής ακρίβειας, το HPLC μπορεί εύκολα να οδηγήσει σε ορισμένα ενοχλητικά μικρά προβλήματα εάν δεν λειτουργεί με τον σωστό τρόπο κατά τη χρήση.Ένα από τα πιο συνηθισμένα προβλήματα είναι το πρόβλημα συμπίεσης στηλών.Πώς να αντιμετωπίσετε γρήγορα ένα ελαττωματικό χρωματογράφο.Το σύστημα HPLC αποτελείται κυρίως από μια φιάλη δεξαμενής, μια αντλία, έναν εγχυτήρα, μια στήλη, έναν θάλαμο θερμοκρασίας στήλης, έναν ανιχνευτή και ένα σύστημα επεξεργασίας δεδομένων.Για ολόκληρο το σύστημα, οι κολώνες, οι αντλίες και οι ανιχνευτές είναι τα βασικά στοιχεία και οι κύριες θέσεις που είναι επιρρεπείς σε προβλήματα.

Το κλειδί για την πίεση της στήλης είναι η περιοχή που χρειάζεται ιδιαίτερη προσοχή κατά τη χρήση HPLC.Η σταθερότητα της πίεσης της στήλης σχετίζεται στενά με το χρωματογραφικό σχήμα κορυφής, την απόδοση της στήλης, την απόδοση διαχωρισμού και τον χρόνο συγκράτησης.Η σταθερότητα της πίεσης στη στήλη δεν σημαίνει ότι η τιμή της πίεσης είναι σταθερή σε μια σταθερή τιμή, αλλά μάλλον ότι το εύρος διακύμανσης της πίεσης είναι μεταξύ 345 kPa ή 50 PSI (επιτρέποντας τη χρήση έκλουσης βαθμίδωσης όταν η πίεση της στήλης είναι σταθερή και μεταβάλλεται αργά).Η πολύ υψηλή ή πολύ χαμηλή πίεση είναι ένα πρόβλημα πίεσης στήλης.

Οι πιο επιρρεπείς σε αστοχίες και λύσεις HPLC

1, η υψηλή πίεση είναι το πιο κοινό πρόβλημα στη χρήση HPLC.Αυτό σημαίνει ξαφνική αύξηση της πίεσης.Γενικά, υπάρχουν οι εξής λόγοι: (1) Γενικά, αυτό οφείλεται σε απόφραξη του καναλιού ροής.Σε αυτό το σημείο, θα πρέπει να το εξετάσουμε τμηματικά.ένα.Αρχικά, κόψτε την είσοδο της αντλίας κενού.Σε αυτό το σημείο, ο σωλήνας PEEK γεμίστηκε με υγρό έτσι ώστε ο σωλήνας PEEK να ήταν μικρότερος από τη φιάλη διαλύτη για να δούμε αν το υγρό έσταζε κατά βούληση.Εάν το υγρό δεν στάζει ή στάζει αργά, η κεφαλή του φίλτρου διαλύτη είναι φραγμένη.Θεραπεία: Μουλιάστε σε νιτρικό οξύ 30% για μισή ώρα και ξεπλύνετε με υπερκαθαρό νερό.Εάν το υγρό στάζει τυχαία, η κεφαλή του φίλτρου διαλύτη είναι κανονική και ελέγχεται.σι.Ανοίξτε τη βαλβίδα εξαέρωσης έτσι ώστε η κινητή φάση να μην διέρχεται από τη στήλη και εάν η πίεση δεν μειωθεί σημαντικά, η λευκή κεφαλή του φίλτρου μπλοκάρεται.Θεραπεία: Οι διηθημένες λευκές κεφαλές αφαιρέθηκαν και υποβλήθηκαν σε υπερήχους με 10% ισοπροπανόλη για μισή ώρα.Υποθέτοντας ότι η πίεση πέσει κάτω από 100 PSI, η φιλτραρισμένη λευκή κεφαλή είναι κανονική και ελέγχεται.ντο.Αφαιρέστε το άκρο εξόδου της στήλης, εάν η πίεση δεν μειωθεί, η στήλη μπλοκάρεται.Θεραπεία: Εάν πρόκειται για απόφραξη ρυθμιστικού άλατος, ξεπλύνετε 95% μέχρι η πίεση να είναι κανονική.Εάν η απόφραξη προκαλείται από κάποιο πιο πολύ διατηρημένο υλικό, θα πρέπει να χρησιμοποιηθεί μια ισχυρότερη ροή από την παρούσα κινητή φάση για την ορμή προς την κανονική πίεση.Εάν η μακροχρόνια πίεση καθαρισμού δεν μειωθεί σύμφωνα με την παραπάνω μέθοδο, η είσοδος και η έξοδος της στήλης μπορεί να θεωρηθεί ότι συνδέονται με το όργανο, αντίθετα, και η στήλη μπορεί να καθαριστεί με την κινητή φάση.Αυτή τη στιγμή, εάν η πίεση της στήλης εξακολουθεί να μην έχει μειωθεί, η πλάκα κόσκινου εισόδου στήλης μπορεί να αντικατασταθεί μόνο, αλλά όταν η λειτουργία δεν είναι καλή, είναι εύκολο να οδηγήσει στη μείωση του φαινομένου της στήλης, επομένως προσπαθήστε να χρησιμοποιήσετε λιγότερο.Για δύσκολα προβλήματα, μπορεί να εξεταστεί το ενδεχόμενο αντικατάστασης στήλης.

(2) Λανθασμένη ρύθμιση ρυθμού ροής: Ο σωστός ρυθμός ροής μπορεί να μηδενιστεί.

(3) Λανθασμένος λόγος ροής: ο δείκτης ιξώδους διαφορετικών αναλογιών ροών είναι διαφορετικός και η αντίστοιχη πίεση συστήματος της ροής με υψηλότερο ιξώδες είναι επίσης μεγαλύτερη.Εάν είναι δυνατόν, οι διαλύτες χαμηλότερου ιξώδους μπορούν να αντικατασταθούν ή να επαναρυθμιστούν και να παρασκευαστούν.

(4) Μετατόπιση μηδενικής πίεσης συστήματος: ρυθμίστε το μηδέν του αισθητήρα στάθμης υγρού.

2, η πίεση είναι πολύ χαμηλή (1) συνήθως προκαλείται από διαρροή συστήματος.Τι πρέπει να κάνετε: Βρείτε κάθε σύνδεση, ειδικά τη διεπαφή και στα δύο άκρα της στήλης και σφίξτε την περιοχή διαρροής.Αφαιρέστε τον στύλο και σφίξτε ή επενδύστε τη μεμβράνη PTFE με την κατάλληλη δύναμη.

(2) Το αέριο εισέρχεται στην αντλία, αλλά η πίεση είναι συνήθως ασταθής αυτή τη στιγμή, υψηλή και χαμηλή.Πιο σοβαρά, η αντλία δεν θα μπορεί να απορροφήσει το υγρό.Μέθοδος επεξεργασίας: ανοίξτε τη βαλβίδα καθαρισμού και καθαρίστε με ταχύτητα ροής 3~5 ml/min.Εάν όχι, αναρροφήθηκαν φυσαλίδες αέρα στη βαλβίδα εξαγωγής χρησιμοποιώντας έναν ειδικό σωλήνα βελόνας.

(3) Χωρίς εκροή κινητής φάσης: ελέγξτε εάν υπάρχει κινητή φάση στη φιάλη του ρεζερβουάρ, εάν ο νεροχύτης είναι βυθισμένος στην κινητή φάση και εάν η αντλία λειτουργεί.

(4) Η βαλβίδα αναφοράς δεν είναι κλειστή: η βαλβίδα αναφοράς κλείνει μετά από επιβράδυνση.Συνήθως πέφτει στο 0,1.~ 0,2 mL/min μετά το κλείσιμο της βαλβίδας αναφοράς.

Περίληψη:

Σε αυτή την εργασία αναλύονται μόνο κοινά προβλήματα στην υγρή χρωματογραφία.Φυσικά, στην πρακτική εφαρμογή μας, θα συναντήσουμε περισσότερα άλλα προβλήματα.Στον χειρισμό σφαλμάτων, θα πρέπει να ακολουθούμε τις ακόλουθες αρχές: αλλάζουμε μόνο έναν παράγοντα κάθε φορά για να προσδιορίσουμε τη σχέση μεταξύ του υποθετικού παράγοντα και του προβλήματος.Γενικά, κατά την αντικατάσταση εξαρτημάτων για αντιμετώπιση προβλημάτων, θα πρέπει να δίνουμε προσοχή στην επανατοποθέτηση των αποσυναρμολογημένων άθικτων εξαρτημάτων στη θέση τους για την αποφυγή σπατάλης.Η δημιουργία μιας καλής συνήθειας εγγραφής είναι το κλειδί για την επιτυχία του χειρισμού σφαλμάτων.Συμπερασματικά, όταν χρησιμοποιείτε HPLC, είναι σημαντικό να δίνετε προσοχή στην προεπεξεργασία του δείγματος και στη σωστή λειτουργία και συντήρηση του εξοπλισμού.