Μια επισκόπηση των δισουλφιδικών δεσμών στη χημεία και τη βιολογία

Χημικά, ο δισουλφιδικός δεσμός αναφέρεται στη λειτουργική ομάδα R-S-S-R "δισουλφιδικών δεσμών συνήθως αποτελούνται από δύο ομάδες θειόλης, στη βιολογία, οι δεσμοί δισουλφιδικών που σχηματίζονται μεταξύ των ομάδων θειόλης σε δύο υπολείμματα κυστεΐνης αποτελούν σημαντικό μέρος της δευτερογενούς και τριτογενούς δομής των πρωτεϊνών.

Σε ήπιες διεργασίες οξείδωσης όπως η οξείδωση και η οξείδωση DMSO, μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν έντονες συνθήκες αντίδρασης όπως H2O2, I2 και υδραργύρου.

Μέθοδος οξείδωσης αέρα:

Η δημιουργία δισουλφιδικών δεσμών με οξείδωση είναι η πιο κλασική μέθοδος στη σύνθεση πεπτιδίων, συνήθως με τη διάλυση πεπτιδίων στην μειωμένη κατάσταση στο νερό, αφού αντιδράσει σε σχεδόν ουδέτερο ή ασθενώς αλκαλικό περιβάλλον (ρΗ 6,5-10) για περισσότερο από 24 ώρες. Για να μειωθεί η πιθανότητα διαμοριακής δισουλφιδικής σύνδεσης, αυτή η μέθοδος συνήθως πρέπει να πραγματοποιείται σε συνθήκες χαμηλής συγκέντρωσης.

Μια επισκόπηση των δισουλφιδικών δεσμών στη χημεία και τη βιολογία

Μέθοδος οξείδωσης ιωδίου:

Τα πεπτίδια διαλύθηκαν σε διάλυμα μεθανόλης 25% ή διάλυμα 30% οξικού οξέος και οξειδώθηκαν με ιώδιο 10 έως 15mol/L ανά σταγόνα για αντίδραση 15 έως 40 λεπτών. "Όταν η πεπτιδική αλυσίδα περιέχει ευαίσθητη στο ιώδιο Tyr, TRP και στη διαδικασία του Met και τα υπολείμματα του, οι συνθήκες οξείδωσης ελέγχονται με μεγαλύτερη ακρίβεια και μετά την οξείδωση, η βιταμίνη C ή το θειοθειικό νάτριο προστίθενται αμέσως για να απομακρυνθεί η περίσσεια ιωδίου".

Στρατηγική διαμόρφωσης δακτυλίων δύο έως πολλών δισουλφιδικών ομολόγων

Εάν η ακολουθία περιέχει δύο ή περισσότερα ζεύγη δισουλφιδικών δεσμών που πρέπει να είναι βρόχοι, υπάρχουν συνήθως δύο καταστάσεις:

Η φύση είναι ένας τυχαίος βρόχος:

Το Cys βρέθηκε τυχαία στην ακολουθία, παρόμοια με την κατάσταση βρόχου ενός ζεύγους δισουλφιδικών δεσμών.

Δακτύλιος σταθερού σημείου:

Σύμφωνα με τις απαιτήσεις σχεδιασμού, ο καθορισμένος βρόχος, δηλαδή το CYS στην ακολουθία, παράγει δισουλφιδικά δεσμούς και η διαδικασία αντίδρασης είναι πολύπλοκη. Πριν από τη σύνθεση της στερεάς φάσης των πεπτιδίων, είναι απαραίτητο να σχεδιάσουμε εκ των προτέρων την αλληλουχία και τη μέθοδο παραγωγής αρκετών ομάδων δισουλφιδικών δεσμών, επιλέξτε διαφορετικές ομάδες προστασίας της ομάδας πλευρικής αλυσίδας και επωφεληθείτε από τις διαφορές ιδιοκτησίας τους για να οξειδώσουν σταδιακά για να παράγουν δύο ή περισσότερα ζεύγη δισουλφιδικών δεσμών. Γενικά χρησιμοποιούμενα προστασία βάσης είναι TRT, ACM, MMT, TBU, BZL, MOB, διάφορες ομάδες όπως το TMOB.

Μετά το σχεδιασμό της ακολουθίας παραγωγής των δισουλφιδικών δεσμών και της στρατηγικής προστασίας της πλευρικής αλυσίδας CYS, θα πρέπει να πάρουμε μια μικρή ποσότητα ρητίνης για να κόψουμε μετά τον σχηματισμό δακτυλίου κάθε ζεύγους δεσμών δισουλφιδίου και να εκτελέσουμε την επαλήθευση της MS της διάσπασης της συσκευής. Το διάγραμμα επαλήθευσης MS θα παρέχεται μαζί με την αποστολή.