Η χημική αντίσταση των πεπτιδίων εξαρτάται από τη σύνθεση και την αλληλουχία των αμινοξέων. Τα λυοφιλοποιημένα πεπτίδια είναι γενικά πιο ανθεκτικά από τους ομολόγους τους σε διάλυμα. Οι πιθανές μέθοδοι υποβάθμισης των πεπτιδίων είναι οι εξής:
1, υδρόλυση: Αυτό συνήθως περιλαμβάνεται στο ASP στην αλληλουχία (d) για το πρόβλημα στο πεπτίδιο, είναι πολύ εύκολα αφυδατωμένο για να σχηματίσει ένα ενδιάμεσο δακτύλιο imide. Για παράδειγμα, υπάρχει ASP στην ακολουθία. -Προ (DP) Σε αυτή την περίπτωση, το ενδιάμεσο ιμίδιο σχήματος δακτυλίου που παράγεται από την όξινη κατάλυση θα οδηγούσε στη διάσπαση της αλυσίδας πεπτιδίων. Παρομοίως, η Asp-Gly (DG) υπάρχει στην ακολουθία και στην περίπτωση αυτή το κυκλικό ενδιάμεσο μπορεί να υδρολύσει στον αρχικό τρόπο ASP του ισοασπαρτικού οξέος (αβλαβής) ή ενός δυνητικά ανενεργού ανάλογο. Τέλος, όλα τα μοτίβα ασπαρτικού οξέος θα μπορούσαν να μετατραπούν πλήρως σε ανάλογα ισοασπαρτικού οξέος. "Σε μικρότερο επίπεδο, περιέχει Ser (S), μια ακολουθία που σχηματίζει επίσης ένα κυκλικό ιμιδοειδές ενδιάμεσο που τελικά καθαρίζει την αλυσίδα πεπτιδίων".
2, Deamidation: Αυτή η βασική καταλυόμενη αντίδραση εμφανίζεται συχνά παρουσία Asn-Gly (Ng) ή Gln-Gly (QG) στην ακολουθία και ακολουθεί έναν παρόμοιο μηχανισμό αλληλουχίας Asp-Gly (DG). Η απομάκρυνση (απώλεια αμίνης) στην αλληλουχία ASN-gly αποδίδει ένα ενδιάμεσο κυκλικό imide, το οποίο στη συνέχεια υδρολύεται για να αποδώσει ανάλογα ασπαρτικού οξέος Asn ή ισοασπαρχίου. Επιπλέον, το ενδιάμεσο δακτυλιοειδές-imide μπορεί να προκαλέσει D-ASP ή εξωτερική απόρριψη σε ASND-ISO-κάτι παρόμοιο με το ASP, το οποίο μπορεί να είναι ανενεργό.
3, Οξείδωση: Τα υπολείμματα Cys και Met είναι τα κύρια κατάλοιπα που υφίστανται αναστρέψιμη οξείδωση. Η οξείδωση της κυστεΐνης επιταχύνεται σε υψηλότερες τιμές ρΗ, όπου η θειόλη απομακρύνει πιο εύκολα τη πρωτονίωση και είναι επιρρεπής στη δημιουργία δισουλφιδικών δεσμών εντός ή μεταξύ αλυσίδων. Ο δεσμός δισουλφιδίου μπορεί εύκολα να αντιστραφεί με θεραπεία με υδροχλωρική (TCEP). Η μεθειονίνη οξειδώνεται με χημική και φωτοχημεία για την παραγωγή διοξειδίου της μεθειονίνης, η οποία εισέρχεται περαιτέρω διοξείδιο της μεθειονίνης, και τα δύο είναι δύσκολο να αντιστραφούν.
4, η παραγωγή δικετοπιπεραταζίνης και πυρογλουταμικού οξέος: ο σχηματισμός διμεθυλοπιπεραζίνης συνήθως εμφανίζεται όταν η Gly βρίσκεται στην τρίτη θέση του Ν-τερματικού, ειδικά αν η Pro ή η Gly είναι στη θέση 1 ή 2. Μέθοδος διεπεπεπεπειζίνης. Από την άλλη πλευρά, εάν το GLN βρίσκεται στο Ν-τελικό άκρο, ο σχηματισμός πυρογλουταμικού οξέος είναι σχεδόν αναπόφευκτος. Πρόκειται για μια παρόμοια αντίδραση στην οποία το Ν-τερματικό άζωτο επιτίθεται στον άνθρακα της πλευρικής αλυσίδας του Gln για να σχηματίσει την αποαμίνωση ενός αναλογικού πεπτιδίου πυρογλουταμυλίου. Αυτή η μετατροπή εμφανίζεται επίσης με το Ν-τελικό άκρο που περιέχει αναλογικά πεπτίδια πυρογλουταμικού.
5. Racemization: Αυτός ο όρος χρησιμοποιείται ευρέως για να αναφερθεί στη συνολική απώλεια χειρόμορφης ακεραιότητας ενός αμινοξέος ή πεπτιδίου. Η ρακεμοποίηση περιλαμβάνει τη μετατροπή ενός αμινοξέος από ένα εναντιομερές καταλυόμενο με βάση,, συνήθως L-μορφή, στον τύπο 1 των εναντιομερών L-και D-μορφής. : 1. Μίγμα. Αυτό είναι πιο σημαντικό κατά τη διάρκεια της παραγωγής πεπτιδίων, αλλά λιγότερο προβληματική στο τελικό πεπτίδιο. Επιπλέον, ο διακόπτης είναι δύσκολο να ανιχνευθεί και δεν μπορεί να ελεγχθεί.
Μια γενική προσέγγιση για την αποφυγή ή την ελαχιστοποίηση της αποικοδόμησης πεπτιδίου είναι να υποβαθμιστεί το πεπτίδιο στους-20 ° C ή καλύτερα-80 ° C για αποθηκευμένη αποθήκευση κατάψυξης, εάν είναι διαθέσιμη. Εάν το πεπτίδιο βρίσκεται σε υδατικό διάλυμα, κάθε δείγμα υποπολλαπλασιασμού πρέπει να καταψυχθεί για να αποφευχθεί η κατάψυξη και η απόψυξη. Η έκθεση σε PH & GT πρέπει να αποφεύγεται. Μεσαίο 8. Ωστόσο, εάν απαιτείται pH & GT; Εάν το πεπτίδιο λιώνει στα 8, η έκθεσή του πρέπει να είναι ελάχιστη.
Χρόνος δημοσίευσης: 2025-07-01